食用菌菌种沙土保藏法是将食用菌孢子保藏于干燥的无菌沙土中,保藏期为2一10年。具体方法如下:
1.取河沙过筛(60~80目筛子),除去大沙粒,用10%的盐酸浸泡以除去有机物。盐酸用量以淹没沙面为宜。浸泡2~4h后,倒去盐酸,用水洗几次,直到接近中性,烘干或晒干。
2.沙与土比例以2 :l~4 :1为宜,沙过多影响菌种保藏质量,土过多时易结块,接种后抽干困难。
3.把干沙、土按比例混合压装于安瓿管或小试管,装入量以0.5~lcm为宜,加棉塞,高压蒸汽灭菌(压力在0.15MPa)灭菌3次,每次30min,干热灭菌(160℃,2h)。待无菌检查合格后(取少许干沙土放入牛肉汤培养液中,无菌生长)方可使用。
4.用接种环将孢子接于沙土管中拌匀即可。或将孢于接于5mL无菌水的试管中,充分播匀成孢于悬液,然后用lmL无菌吸管吸取孢子悬液加入沙土管中(每管加0.2mL)即可。
5.将接种后的沙土管置于盛有干燥剂(生石灰、氯化钙或硅胶)的容器内,接上0.5KW的真空泵抽气约8h,使沙土基本干燥。
6.经抽样检查,证明无杂菌生长,即可封口进行保藏。